1.Thin Schicht Identifikation Methode
Nehmen Sie 0,5 g Epimedium- Heilkräuterpulver oder eine geeignete Menge Extrakt, fügen Sie 10 ml Ethanol hinzu, tauchen Sie 30 Minuten lang ein, filtrieren Sie und dampfen Sie das Filtrat ein. Füge 1 ml Ethanol hinzu, um den Rückstand aufzulösen, der die Testlösung darstellt. Die Icariin-Referenzsubstanz wurde gewogen, in Methanol gelöst und auf 0,1 mg / ml verdünnt, was die Referenzlösung war. Je 10 µl der Testlösung bzw. der Referenzlösung auf eine Kieselgel-H-Dünnschichtplatte der gleichen Natriumcarboxymethylcellulose als Bindemittel mit Ethylacetat-Butanon-Ameisensäure-Wasser (10: 1: 1) pipettieren : 1) als Entwicklungsmittel, abgerollt, herausgenommen, luftgetrocknet und zur Untersuchung in eine UV-Lampe (365 nm) gegeben. Im Chromatogramm der Testprobe erscheint derselbe dunkelrote Fleck an der Position, die dem Chromatogramm der Referenzsubstanz entspricht. mit Trichlorierung besprüht Die Aluminiumtestlösung wurde erneut mit einer UV-Lampe (365 nm) aufgetragen, um den gleichen orangeroten fluoreszierenden Fleck zu zeigen.
2. Spektrophotometrische Bestimmung der Gesamtflavonoide in Epimedium und seinen Extrakten
Das Referenzprodukt Icariin wurde genau abgewogen und mit Methanol zu einer Standardlösung von 10 & mgr; g / ml formuliert. Die Menge dieses Produktpulvers (entspricht etwa 1 mg Icariin) wird genau abgewogen, mit Methanol 25 ml 30 Minuten lang beschallt, in einen 50-ml-Messkolben verdünnt, mit einer mikroporösen Membran von 0,45 & mgr; m filtriert, dh die Produktlösung wird getestet. Die Testlösung und die Referenzlösung wurden getrennt genommen und die Extinktion wurde bei einer Wellenlänge von 270 nm mit dem Reagenz als Leerwert gemessen und die Berechnung wurde erhalten.
3. Bestimmung von Icariin in Epimedium und dessen Extrakt mittels HPLC
Chromatographiebedingungen und Systemeignungstest: ODS2 5u C18 (4 mm × 150 mm) -Säule; mobile Phase: Acetonitril-Wasser (30:70); Detektionswellenlänge: 270nm; Fließgeschwindigkeit: 0,8 ml / min. Die Anzahl der theoretischen Stufen beträgt nicht weniger als 1500, basierend auf Icariin.
Herstellung der Referenzlösung: Das Referenzprodukt Icariin wurde genau abgewogen und eine Lösung von 0,1 mg / ml mit Methanol hergestellt.
Vorbereitung der Testlösung: Die geeignete Menge dieses Produktpulvers (entspricht etwa 1 mg Icariin) genau abwägen, mit Methanol 25 ml 30 Minuten lang beschallen, auf 50 ml Messkolben verdünnen, 0,45 μm mikroporöser Filter verwenden. Die Membranfiltration ist die Testlösung.
Assay-Methode: 10 & mgr; l jeder Probenlösung und Referenzlösung wurden in das HPLC-Instrument injiziert, und die Fläche wurde nach der externen Standardmethode berechnet.